线粒体异柠檬酸脱氢酶活性检测试剂盒

线粒体异柠檬酸脱氢酶活性检测试剂盒

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产品描述 异柠檬酸脱氢酶（Isocitrate dehydrogenase，IDH）作为三羧酸循环中的关键酶参与细胞能量代谢， 能够催化异柠檬酸氧化脱羧生成 α-酮戊二酸（α-Ketoglutarate，α-KG），并将 NAD 还原为 NADH。线 粒体异柠檬酸脱氢酶（ICDHm）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体中，对生物体能 量代谢、生物合成及抗氧化胁迫具有重要作用。 ICDHm 催化异柠檬酸生成 α-酮戊二酸，并将 NAD+还原为 NADH，α-酮戊二酸在 505 nm 处具有 特征吸收峰，通过吸光度的变化即可表征 ICDHm 的活性。

注意事项 ①若吸光值超过 1，建议将待测样本使用提取液 C 适当稀释后再进行测定，计算时相应修改； ②为保证结果准确且避免试剂损失，测定前请仔细阅读说明书（以实际收到说明书内容为准）， 确认试剂储存和准备是否充分，操作步骤是否清楚，且务必取2-3个预期差异较大的样本进行预测定， 过程中问题请您及时与工作人员联系； ③建议使用蛋白浓度计算酶活，若使用样本质量计算则需加测胞浆提取物酶活，上清（胞浆提取 物）和沉淀（线粒体）酶活之和即为总酶活。 附：使用样本质量计算的公式 ①胞浆提取物 ICDHm 活性计算 单位定义：每 g 组织每分钟生成 1 nmol α-酮戊二酸定义为一个酶活力单位。 ICDHm（U/g）= x×V 样×V 提×103 W×V 样×T = 16.83×x W 注释：V 样：反应体系中加入待测样本的体积，0.04 mL；V 提：加入提取液的体积，1.01 mL； W：样本质量，g；T：反应时间，1 h = 60 min；103：单位换算系数 1 μmol =103 nmol。 ②线粒体 ICDHm 活性计算 单位定义：每 g 组织每分钟生成 1 nmol α-酮戊二酸定义为一个酶活力单位。 ICDHm（U/g）= x×V 样×V 提×103 W×V 样×T = 6.73×x W 注释：V 样：反应体系中加入待测样本的体积，0.04 mL；V 提：1-④中沉淀重悬时加入提取液的 体积，0.404 mL；W：样本质量，g；T：反应时间，1 h = 60 min；103：单位换算系数 1 μmol =103 nmol。 ③ ICDHm 总活性计算 ICDHm 总活性=胞浆提取物 ICDHm 活性+线粒体 ICDHm 活性 = 16.83×x W + 6.73×x W