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酶活测定试剂盒在ATP酶反应中的应用

发布时间: 2023-01-16  点击次数: 886次
  酶活测定试剂盒提供了一种强大而便捷的方法来测量活细胞中的Caspases酶活性。这些测定法利用含有识别位点的可渗透细胞的底物来测量Caspases3和7,Caspases8或Caspases9的活性,以及可以同时测量四种Caspases的多重检测试剂盒。
 
  基于高度水溶性的四唑盐进行测定。WST-8在电子介体的作用下可还原生成水溶性甲瓒产物,产生颜色反应。WST-8被细胞中的脱氢酶还原而生成橙色产物(甲瓒),可溶于组织培养基中。细胞中脱氢酶产生的甲瓒产物的量与活细胞的数量成正比。CCK-8法应用非常广泛,如药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。
 
  ATP酶,又称为三磷酸腺苷酶,是一类能将三磷酸腺苷(ATP)催化水解为二磷酸腺苷(ADP)和磷酸根离子的酶,这是一个释放能量的反应。在大多数情况下,能量可以通过传递而被用于驱动另一个需要能量的化学反应。这一过程被所有已知的生命形式广泛利用。
 
  基于CCK-8试剂低的细胞毒性,实验所用的细胞可用于后续的下游实验;CCK-8是非放射性的,可在细胞增殖和细胞毒性实验中,对活细胞进行灵敏的比色测定,从而计算出细胞数量。
 
  鸟苷-5'-三磷酸,(GTP),是一类嘌呤类核苷三磷酸,GTP在信号转导过程中起重要的作用,特别是和G蛋白作用时以及在二信使机制中,在GTP酶的催化作用下,GTP会转化为GDP(二磷酸鸟苷)。
 
  GTP主要在以下几个生物过程中起着重要作用:能量转化GTP参与细胞中的能量转化过程,比如,在三羧酸循环中,一种酶能产出GTP分子。这也相当于产生了一分子的ATP,因为GTP能被核苷二磷酸激酶(NDK)转化为ATP分子。
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