含量试剂盒中亚硫酸钠能够还原Fe3+为Fe2+,Fe2+进一步与2,2’-联吡啶显色,产物在520nm处具有特征吸收峰,通过吸光值的变化即可定量检测铁的含量。
铁是人体需要的微量元素之一,它是血红蛋白、肌红蛋白、细胞色素及其他酶系统的主要成分,帮助氧的运输,促进脂肪氧化.缺乏铁元素容易造成贫血、代谢纷乱,并影响机体的免疫功能.亚硫酸钠还原Fe3+生成Fe2+,Fe2+进一步与2,2’-联吡啶显色,在520nm处有吸收峰,测定该波长吸光度即可计算铁含量。
组织铁含量计算:
1.按组织质量计算:
组织铁含量(μg/g质量)=(C标准液×ΔA测定÷ΔA标准)×V提取×55.845÷W=6.98×ΔA测定÷ΔA标准÷W
2.按组织蛋白浓度计算:
组织铁含量(μg/mgprot)=(C标准液×ΔA测定÷ΔA标准)×V提取×55.845÷(Cpr×V提取)=6.98×ΔA测定÷ΔA标准÷Cpr
C标准液:0.125μmol/mLFe3+标准液;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本质量,g;V提取:提取液体积,1mL;55.845:Fe的相对分子质量,55.845μg/μmol。
注意事项:
1、当ΔA大于0.6时,建议将样本用提取液稀释后进行测定。
2、试剂一溶解变黑后则不能使用;试剂二有毒性,做好防护措施。